大家都爱看！小鼠肺原位注射

WHO、GIobcan 2020统计报道2020年肺癌新发病例2206771例，占比约11.4%，是2020年癌症病发率的第二位，而肺癌死亡病例为1796144例，占比约18%，病死率排第一位。尽管手术、放疗、化疗和靶向治疗取得了很大进展，但由于在诊断时大多数患者已局部晚期或出现转移，预后仍然较差，5年生存率仅为15%！。医学动物实验是基础实验研究的重要组成部分，更是临床实验及治疗的理论依据和基础。

本期我们将分享小鼠肺原位注射相关知识：
一、肺部解剖

肺原位注射用于肺局部给药和肿瘤细胞种植。
小鼠左肺仅有1叶，右肺有4叶，分为右前叶、右中叶、右后叶和较小的腔后叶。因此，进行局部给药和肿瘤细胞种植时通常选择左肺。
小鼠左肺侧位体表位置：冠状面在左肩关节水平线以下，横截面以左上臂后缘为中心。

二、注射所需器械与耗材

器械与耗材：
（1）29G胰岛素注射器
（2）标尺
（3）眼科剪
（4）眼科镊
（5）细胞染色液
三、操作方法

（1）距离针尖5mm处，将针头弯曲约90°；

（2）将小鼠麻醉，然后右侧卧固定，备皮消毒；

（3）于腋中线上、肋缘和肩锁关节中间部位，将皮肤作1cm开口；

（4）钝性分离皮下组织，明显可见左肺轮廓；

（5）注射器中吸入20-50ul细胞混悬液；

（6）将胰岛素注射器针头完全垂直通过肋间刺入肺中；

（7）注射细胞，静止数秒后拔针；

（8）闭合创口，消毒，待小鼠苏醒。

四、结果展示

分别注射25ul和50ul染色液，注射后解剖可见肺部明显液体蓄积。

五、注意事项

（1）注意针头不刻意下压，以免贯通左肺肺叶；

（2）由图可见，注射量不宜超过50ul，为了保证注射物可以局限在左肺叶内，应适当降低注射量；

（3）小鼠周龄也是影响注射量的原因之一。
六、常见模型案例

小鼠原位肺癌模型构建：选择C57BL/6小鼠，６~８周，雌性，体重约22ｇ。LLC细胞计数板计数及配制２×107个/ML，LLC细胞无血清悬液0.2ML，在 SPF 级手术间操作，腹腔注射浓度为４％的水合氯醛溶液麻醉（麻醉用量为小鼠体重的１％），小鼠右侧卧位，定位于小鼠左侧腋下以碘伏消毒并备皮，再次消毒后行1cm切口，钝性分 离 至 肋 骨 表 面，可 见 明 显 呼 吸 及 肺 脏 活动，在肋骨上缘１ml注射器垂直穿刺约3mm，缓慢注射细胞悬液约50μｌ并停留３～５ｓ迅速拔针，观察数秒是否气胸形成，呼吸如常，碘伏再次消毒以细丝线单纯间断缝合２针。

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