力荐好文！动物体内药代动力学研究要素

一

剂量选择

药代动力学(pharmacokinetics)是动力学原理用于药物的一门边缘学科和交叉学科，它致力于研究药物及其他外源性物质(xenobiotics)在体内动态行为的量变规律，即药物的吸收、分布、代谢、消除和排泄(ADME)等的处置(dSp0Sito),数量（浓度）与时间的关系。它对药物研究开发、临床合理用药和药品质量控制具有重大的理论和实用价值。

动物体内药代动力学研究应至少设置三个剂量组，其高剂量最好接近最大耐受剂量，中、小剂量根据动物有效剂量的上下限范围选取。主要考察在所试剂量范围内，药物的体内动力学过程是属于线性还是非线性，以利于解释药效学和毒理学研究中的发现。

二

试验动物

一般采用成年和健康的动物。常用动物有小鼠、大鼠、兔、豚鼠、犬、小型猪和猴等。深圳灵赋拓普生物大动物实验中心具有豚鼠、兔、小型猪、比格犬、猴等实验动物使用资质，建立了大动物饲养室和大动物手术室，可开展大中型动物实验，满足客户多样需求

动物选择的一般原则如下：
1、首选动物：尽可能与药效学和毒理学研究一致；
2、尽量在清醒状态下试验，动力学研究最好从同一动物多次采样；
3、创新性的药物应选用两种或两种以上的动物，其中一种为啮齿类动物；另一种为非啮齿类动物（如犬、小型猪或猴等）。其他药物，可选用一种动物，建议首选非啮齿类动物；
4、经口给药不宜选用兔等食草类动物。

三

给药途径

一般而言，所用的给药途径和方式应与临床用药一致。实验时常用的给药途径有经口给药（口服、灌胃）、皮下注射、腹腔注射和静脉注射、脑内给药、直肠内给药、经皮肤给药等给药方法。

四

研究项目

1、血药浓度-时间曲线
2、吸收
3、分布
4、排泄
5、与血浆蛋白的结合
6、生物转化
7、对药物代谢酶活性的影响

五

血药浓度-时间曲线鉴定

1、 受试动物数
（1） 血药浓度-时间曲线的每个采样点不少于5个数据，最好从同一动物个体多次取样；
（2）如由多只动物的数据共同构成一条血药浓度-时间曲线，应相应增加动物数，以反映个体差异对试验结果的影响；
（3） 建议受试动物采用雌雄各半，如发现动力学存在明显的性别差异，应增加动物数以便认识受试物的药代动力学的性别差异。对于单一性别用药，可选择与临床用药一致的性别。

2、采样点
（1） 给药前需要采血作为空白样品，观察血浆的基质效应；
（2）为获得一个完整的血药浓度-时间曲线，采样时间点的设计应兼顾药物的吸收相、平衡相（峰浓度附近）和消除相。一般在吸收相至少需要2-3个采样点，对于吸收快的血管外给药的药物，应尽量避免第一个点是峰浓度（Cmax）；在Cmax附近至少需要3个采样点；消除相需要4-6个采样点；
（3）整个采样时间至少应持续到3-5个半衰期，或持续到血药浓度为Cmax的1/10-1/20；
（4） 为保证最佳采样点，建议在正式试验前，选择2-3只动物进行预试验，然后根据预试验的结果，审核并修正原设计的采样点。

3、给药方式
（1） 口服给药：一般在给药前应禁食12小时以上，以排除食物对药物吸收的影响。另外在试验中应注意根据具体情况统一给药后禁食时间，以避免由此带来的数据波动及食物的影响，一般可以在口服给药3-4小时后就可以给水给粮；
（2）注射给药：饮食饮水对血液中药物影响不大。

4、 药代动力学参数
根据试验中测得的各受试动物的血药浓度-时间数据，求得受试物的主要药代动力学参数。静脉注射给药，应提供t1/2（消除半衰期）、Vd（表观分布容积）、AUC（血药浓度-时间曲线下面积）、CL（清除率）等参数值；血管外给药，除提供上述参数外，尚应提供Cmax和Tmax（达峰时间）等参数，以反映药物吸收的规律。另外，提供统计矩参数，如MRT（平均滞留时间）、AUC(0-t)和AUC(0-∞)等，对于描述药物药代动力学特征也是有意义的。

5、 多次给药药代动力学研究
当药物在临床上将连续多次应用时，需明确多次给药的药代动力学特征。根据研究目的，应考察药物多次给药后的稳态浓度（Css），药物谷、峰浓度的波动系数（DF），以及是否存在药物蓄积作用和/或药酶的诱导作用。

六

吸收

1、对于经口给药的新药，应进行整体动物试验，尽可能同时进行血管内给药的试验，提供绝对生物利用度。如有必要，可进行在体或离体肠道吸收试验以阐述药物吸收特性；

2、对于其他血管外给药的药物及某些改变剂型的药物，应根据立题目的，尽可能提供绝对生物利用度。

七

分布

1、选用大鼠或小鼠做组织分布试验较为方便。选择一个剂量（一般以有效剂量为宜）给药后，至少测定药物在心、肝、脾、肺、肾、胃肠道、生殖腺、脑、体脂、骨骼肌等组织的浓度，以了解药物在体内的主要分布组织；

2、特别注意药物浓度高、蓄积时间长的组织和器官，以及在药效或毒性靶器官的分布（如对造血系统有影响的药物，应考察在骨髓的分布）；

3、每个时间点，至少应有5个动物的数据；

4、参考血药浓度-时间曲线的变化趋势，选择至少3个时间点分别代表吸收相、平衡相和消除相的药物分布。若某组织的药物浓度较高，应增加观测点，进一步研究该组织中药物消除的情况；

5、进行组织分布试验，必须注意取样的代表性和一致性；

6、同位素标记物的组织分布试验，应提供标记药物的放化纯度、标记率（比活性）、标记位置、给药剂量等参数；提供放射性测定所采用的详细方法，如分析仪器、本底计数、计数效率、校正因子、样品制备过程等；提供采用放射性示踪生物学试验的详细过程，以及在生物样品测定时对放射性衰变所进行的校正方程等。尽可能提供给药后不同时相的整体放射自显影图像。

八

排泄

1、尿和粪的药物排泄：一般采用小鼠或大鼠，将动物放入代谢笼内，选定一个有效剂量给药后，按一定的时间间隔分段收集尿或粪的全部样品，测定药物浓度。粪样品晾干后称重（不同动物粪便干湿不同），按一定比例制成匀浆，记录总体积，取部分样品进行药物含量测定。计算药物经此途径排泄的速率及排泄量，直至收集到的样品测定不到药物为止；

2、每个时间点至少有5只动物的试验数据；

3、应采取给药前尿及粪样，并参考预试验的结果，设计给药后收集样品的时间点，包括药物从尿或粪中开始排泄、排泄高峰及排泄基本结束的全过程；

4、胆汁排泄：有的药物经胆汁排泄在肠中再次被吸收形成肝肠循环，可使药物作用时间延长。一般用大鼠在乙醚麻醉下作胆管插管引流，待动物清醒后给药，并以合适的时间间隔分段收集胆汁，进行药物测定；

5、记录药物自粪、尿、胆汁排出的速度及总排出量（占总给药量的百分比），提供物质平衡的数据。

九

与血浆蛋白的结合

1、药物与蛋白的结合会明显影响药物分布与消除的动力学过程，并降低药物在靶部位的作用强度。对蛋白结合率高于90%以上的药物，建议开展体外药物竞争结合试验，即选择临床上有可能合并使用的高蛋白结合率药物，考察对所研究药物蛋白结合率的影响；

2、研究药物与血浆蛋白结合试验可采用多种方法，如平衡透析法、超过滤法、分配平衡法、凝胶过滤法、光谱法等；

3、根据药物的理化性质及试验室条件，可选择使用一种方法进行至少3个浓度（包括有效浓度）的血浆蛋白结合试验，每个浓度至少重复试验三次，以了解药物的血浆蛋白结合率是否有浓度依赖性。

十

生物转化

对于创新性的药物，尚需了解在体内的生物转化情况，包括转化类型、主要转化途径及其可能涉及的代谢酶。对于新的前体药物，除对其代谢途径和主要活性代谢物结构进行研究外，尚应对原形药和活性代谢物进行系统的药代动力学研究。

十一

对药物代谢酶活性的影响

对于创新性的药物，应观察药物对药物代谢酶，特别是细胞色素P450同工酶的诱导或抑制作用。可观察整体动物多次给药后的肝P450酶或在药物反复作用后的肝细胞（最好是人肝细胞）P450酶活性的变化，以了解该药物是否存在潜在的代谢性相互作用。

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