小鼠行为学实验（上）

小鼠行为学实验是研究人类发病机制、评价疾病模型造模效果和新药效果的一种重要实验手段，在生命科学、医学、药学等领域中被广泛应用。小鼠行为学实验可以科学客观地评价其沟通、社交、学习和探索能力等。

行为学实验均采用同窝对照原则，将实验组和对照组小鼠每组取 10 只左右进行实验，小鼠的饲养条件为：4-5只同性别小鼠饲养于底部垫锯末碎屑的透明塑料箱，自由饮水和喂食，饲养室恒温（25±0.5℃）、恒湿（50-60%）、环境安静、通风。

在行为学实验前由实验人员对小鼠进行为期一周的抚摸，每天5min，并且在测试前30-60 min将小鼠带入测试室，让其适应实验环境，避免搬运过程和新环境给小鼠带来焦虑情绪，实验室应当保持安静，禁止在同一实验室内处死动物或对动物进行采血。

(一)旷场实验

⏩小鼠在新异环境中对新奇事物充满好奇，会出现探索行为，但也有畏惧空旷场地的天性，从而出现趋避行为。旷场实验(Open Field Test，OFT)就是利用小鼠的天性，对其紧张度和探索性行为进行判断，系统评估小鼠的探索能力、基本运动能力以及焦虑行为。

每个旷场试验箱的尺寸为40cm*40cm*35cm，需将小鼠提前30-60min放置在实验区域附近。实验时把小鼠轻放在箱子中央，让小鼠在实验箱内自由探索30min，用视频软件录制小鼠30min内的运动轨迹，并用视频分析软件进一步分析小鼠在30min内运动的总距离、在中心位置停留的时间及前5min内运动的总距离和在中心位置停留的时间。在实验前后均用75%酒精充分擦拭实验装置，避免气味对实验结果造成影响。如果小鼠更倾向于在旷场试验箱中间运动，解读为抗焦虑行为，反之则为焦虑行为。

(二)埋珠实验

⏩埋珠实验(Marble Burying Test)是检测小鼠是否出现刻板行为的主要手段，首先准备干燥清洁的40cm*30*22cm的饲养盒，底部铺5cm厚的垫料，把准备好的20颗标准玻璃珠（直径14mm-15mm）按4列5行均等摆放在垫料上，把小鼠轻放至盒子的同一个角，测试30min，如果玻璃珠超过三分之二的部分被垫料覆盖，则认为该玻璃珠被小鼠掩埋。记录测试小鼠掩埋的玻璃珠数量，数量越多，说明小鼠越刻板。

 (三)Y迷宫实验

⏩Y迷宫实验（Y-maze Test）模型用来研究小鼠的空间识别记忆能力，这种迷宫利用了小鼠对新异环境天然探究的自然习性，不需要动物学习任何规则来趋利避害，能够有效地反映出动物对新异环境的识别记忆能力，本实验采用磨砂非透明有机塑料，按“Y”的形状制作，分为A，B，C三个臂（长35cm，宽10cm，高20cm），三个臂之间的夹角均为120°。实验开始时，把小鼠按同一方向放置在三个臂的交界处，任其在装置内穿梭，记录5min内小鼠进入各臂的顺序，小鼠进入各臂三分之二及以上处记为成功进入该臂，否则不算进入。为了消除动物之间的气味，保证实验仪器的环境卫生，在实验前后均使用75% 酒精进行擦拭，待酒精挥发干净再进行下一轮实验，味道和残留的酒精均会影响实验动物的行为结果。实验结束后分析进入各臂的顺序，按“ABC” “ACB” “BCA”“BAC”“CAB”“CBA”出现的形式记为正确转换。正确转换率=（正确转换次数/总转换次数）*100%，正确转换率越高，说明小鼠空间识别记忆能力越强。

(四)高架十字迷宫实验

⏩高架十字迷宫（Elevated-plus maze Test，EPM）通常由两段开臂和两段闭臂构成，距离地面51cm，底部有一块正方形底座，十字迷宫各臂长66cm，宽5.0cm，闭臂臂高15cm。小鼠由于嗜暗性会倾向于在闭臂中活动，但出于好奇心和探究性又会在开臂中活动，在面对新奇刺激时，动物同时产生探究的冲动与恐惧，这就造成了探究与回避的冲突行为，从而产生焦虑心理。高架十字迷宫实验是一个简单、快速评价小鼠是否焦虑的一种方法，因而广泛应用于抗焦虑药物的研究与开发。

仪器上方装有视频录像，在实验开始前将小鼠放入实验房间适应1h，然后把小鼠轻放在十字迷宫的开臂与闭臂交接处的中心位置，测试开始前小鼠头朝向开臂，释放小鼠的同时点击视频采集，一共录制5min视频，观察者距离迷宫中心至少１m，记录小鼠进入开臂和闭臂的次数和在两臂滞留时间（进出臂标准应严格界定，以四肢全部入臂或两只前爪出臂为准），用SPSS软件进行数据分析。计算小鼠进入开臂次数和在开臂滞留时间分别占总次数（进入开臂和闭臂次数总和）和总时间（在开臂与闭臂滞留时间总和）的百分比，以此评价动物是否焦虑，通常这两个指标呈高度相关，抗焦虑行为表现为小鼠进入开壁次数的百分比和在开壁停留时间百分比均增加，焦虑行为则相反。

总结 

好了，本期小鼠行为学实验知识（上）分享就到此啦，小鼠行为学实验知识（中）、（下）篇我们会持续分享，感兴趣的小伙伴保持关注哦~欢迎大家在评论区讨论，留言您想了解的话题或相关知识。灵赋拓普生物拥有整套行为学仪器设备，详情可咨询致电：0755-86325431，我们竭诚为您服务。